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APC-Brdu细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)图片
产品货号:
KFS326
中文名称:
APC-Brdu细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)
英文名称:
BrdU cell proliferation Detection Kit
产品规格:
20T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒细胞增殖检测是一个基于荧光检测的实验,可以监测细胞健康和通过胸苷掺合来估量DNA合成从而监测细胞分裂。


BrdU(5-溴代-2'-脱氧尿苷,溴脱氧尿苷)是一种合成的核苷酸即胸苷的类似物。BrdU通常被用于检测活组织中再生的细胞。BrdU可以掺合到复制细胞中新的合成DNA中(在细胞周期S期),在DNA复制可代替胸苷。利用抗BrdU的特异性抗体便可以用于检测这个插入的化学品,从而检测出细胞是否在复制其DNA。


组分规格保存
APC-BrdU流式抗体100μL2~8℃,避光
染色缓冲液6mL 2~8℃
洗涤液100mL
变性反应缓冲液6mL
通透液10mL
变性剂1.2mL-20℃



  • 仪器:
    微量移液器、低速离心机、平板摇床、微量移液器、流式细胞仪、1.5mL Microtube
  • 试剂:
    • BrdU (5-溴代-脱氧尿苷,货号:KFS599
    • 2%多聚甲醛固定液
    • 0.125%胰酶消化液
    • 10mM PBS,pH7.5



  • BrdU是光敏型,所以必须在黑暗中加入。细胞加了BrdU以后也可能光敏感,因此也在黑暗中培养。加入BrdU的时间和浓度根据细胞的类型和复制时间来确定,范围在15分钟到2个小时,浓度从10μM到100μM。例如,处理鼠胚胎成纤维细胞为30μM处理60min。



  • 细胞处理步骤:
    • 在最适的环境下培养细胞(细胞密度在临界对数生长期)加入BrdU至终浓度为30μM.孵育30~60分钟。
    • 吸去培养基,PBS洗一次。
    • 0.125%胰蛋白酶消化5~15分钟。
    • 收集细胞方法见BrdU标记步骤中所示。
  • BrdU标记步骤:
    • 收集细胞:1000g,10min收集细胞,以每管500μL洗涤液重悬离心洗涤2次,调整细胞数在105~106/管。
    • 固定:每管加入500μL固定液重悬细胞,4度固定过夜,以每管500μL洗涤液离心洗涤2次,1000g,10min。
    • 通透:每管加入500μL通透液重悬细胞,冰上孵育2分钟,以每管500μL洗涤液离心洗涤2次,1000g,10min。
    • DNA变性:以300μL DNA变性工作液(计算每次反应所需要的变性工作液总量后,以每300μL变性缓冲液
      加入50μL变性剂混匀后,4℃放置待用)重悬细胞,37度反应30min,以每管500μL洗涤液离心洗涤2次,1000g,10min。
    • BrdU标记:以195μL染色缓冲液重悬细胞,加入APC-BrdU抗体5μL(0.125μg)/每管,4度避光孵育30min。
      上流式仪检测,633nm激发波长,660nm发射波长。

相关搜索:APC-Brdu细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)细胞增殖检测试剂盒BrdU cell proliferation Detection Kit
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